Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展很慢的过程中逐渐扩展

从第一次显现去甲化脓性球蛋白到显现1同型高血压病理呕吐的困难重重百余人在成人时期就有很好的描绘出，多个去甲化脓性球蛋白非典型的成人中都有70%在肝细胞转换后10年中患上高血压，而随访15年的成人这一数量减小到84%。相比之下之下，分之二病理1同型高血压一半以上的同型1同型高血压的中都风有助于还没有给予充分的研究课题。

越来越多的人开始可用分期的系统来假设1同型高血压的困难重重：幼体在显现多种去甲化脓性球蛋白时踏入第1先决条件，显现血糖异常时踏入第2先决条件，显现呕吐时踏入第3先决条件。一些多发去甲化脓性球蛋白非典型的幼体，在1期和2期，困难重重较极快，并发展为中都风的1同型高血压。我们以后描绘出了一一组在首次检测到多种去甲化脓性球蛋白结果显示后至少10年无高血压的变极快困难重重者，这一组高血压人口数少，但特点非常明确。随后，我们断定去甲自身抗体特异性CD8+T蛋白底物在困难重重较快的高血压中都必需不实际上，但在未来会中都风和长期实际上的高血压高血压中都很容易检测到。这也许得出论证，与困难重重高血压相比之下，这些高血压化脓性底物的适度增强。

更早研究课题得出论证，尽管适度性T蛋白(Treg)使用量正常，但高血压高血压实际上一些功能缺失，其中都包括对IL-2的底物能力减小。此外，高血压高血压中都的物理现象该CD4+T蛋白也许对适度极富抵抗性，乏善可陈为物理现象该T蛋白的选择性减弱，自然现象造成的Treg和人体内造成的诱导Treg，以及抗体经历的CD4+T蛋白中都IL-2底物减弱。本研究课题的目的是描绘出了CD4+适度性T蛋白(Treg)在这群人极较快困难重重者中都的特点，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访星期为18-32年。

方法：BOX研究课题是一项以人群蓝本的侧向研究课题，在21岁以下发病的高血压亲属中都核查1同型高血压的危险因素。我们以后描绘出了长期较快困难重重者的特点，他们持续保持多重去甲化脓性球蛋白非典型最少10年，但没有显现高血压的病理呕吐，极快性或非透过性化脓性。随后，10名此后持续保持无高血压并愿意备有大量血液结果显示的较快困难重重者扩展到T和B蛋白功能归纳。在目前的研究课题中都，8名极快困难重重者(SP一组)，中都位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁密切关系的去甲化脓性球蛋白非典型。所有的参与者都西北面1同型高血压困难重重的1期，尽管一些人随后失去了去甲化脓性球蛋白对某些抗体的非典型底物，然而，一名高血压仍未西北面2期至少6年，但没有显现病理呕吐，一名高血压被发病为高血压，该受试者72岁，在采自实验结果显示时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在的测试中都对该酪氨酸透过了单独归纳报告。分开外周血单个核蛋白(PBMCs)，采用多给定流式蛋白术和T蛋白选择性试验中都归纳报告酪氨酸中都Treg的基频、遗传和功能。可用FlowSOM和CITRUS(聚类比对、密切相关和回归)透过无行政官员聚类归纳，归纳报告Treg遗传。

结果：与卫生酪氨酸相比之下，来自极快困难重重体的遗忘CD4+T蛋白的行政官员聚类结果显示，应答的遗忘CD4+ Treg基频减小，与糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白(GITR)隐含减小有关。一名HbA1c升高的高血压与困难重重较快者和匹配的印证一组相比之下，Treg谱并不相同。功能归纳得出论证，与卫生酪氨酸相比之下，来自较快困难重重体的Treg介导的CD4+物理现象该T蛋白选择性引人注意受损。乏善可陈为对物理现象该CD4+T蛋白CD25和CD134隐含的选择性减小。

平面图1 深入的遗传归纳结果显示，CD4+Treg亚同型在极快困难重重路由表中都减小。由FlowSOM作用于的Treg室，聚集在来自所有酪氨酸的活CD4+CD45RA -蛋白上。根据标示出物隐含比对出10个元簇:遗忘T蛋白_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;遗忘T cell_4;CD49b遗忘T蛋白;HLA-DR + GITR +遗忘T蛋白;磁盘Treg_1;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;和磁盘Treg_4。(a)可用9个不同Treg标示出作用于的10个元簇的MST。每个数据流均是由一个协同(100个协同)，更大的元协同(10个元协同)在数据流一组区域内着色。每个数据流中都的饼平面图暗示单个标示出的隐含级别。(b)每个元聚类的热平面图，以结果显示整体标示出隐含。(c, d)为HD一组(c)和SP一组(d)作用于平面图，以及FlowSOM识别的每个元簇的大块。(e-l)相比较丰度为每个metacluster装有支线平面图(丰度> 0.05%)确定为HD和SP一组:磁盘Treg_2 (e),磁盘Treg_3 (f),磁盘Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +遗忘T蛋白(h)、遗忘T cell_1(i),遗忘T cell_2 (j),遗忘T cell_3 (k) n d CD49b遗忘T蛋白(l)。红色圆点均是由**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩验证。此键适用于平面图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

平面图2 可用CITRUS的预测模同型证实，Treg基频的减小是困难重重较快的标志。分级除此以外(a - f)和棉花归纳(g-k)比较SP参与者和匹配的HD参与者在CD4+CD45RA−T蛋白上的关联性。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会群体的均是由性平面图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR隐含透过分开，模拟FlowSOM社会群体。(b) HD(白点)和SP(蓝点)一组以及酪氨酸SP 606(红色)中都CD25+ cd127的基频核心内容平面图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+除此以外子集的装有支线平面图;(c) HLA-DRloGITR−(磁盘Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(磁盘Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(磁盘Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+磁盘T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋状由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3隐含强度着色，左下角突出的簇被识别为SP和HD路由表密切关系的不同。(j)装有支线平面图结果显示了在SP(蓝点)和HD(灰点)一组中都，CITRUS遗忘Treg_3和Treg_4的相比较丰度(数量)。(k)直方平面图结果显示每个簇的遗传(粉红色)和Treg标示出相比较隐含与剧中都隐含(深蓝色);上列，磁盘Treg_3;一个大一行，磁盘Treg_4。剧中都与所有其他簇中都标示出的隐含有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩验证

平面图3 与卫生献血者相比之下，困难重重较快者遗忘treg的GITR减小。每个遗忘CD4+T蛋白元簇(遗忘T蛋白_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;CD49b +遗忘T蛋白;HLA-DR + GITR +遗忘T蛋白;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检测每个隐含标示出的发生变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)路由表的隐含热平面图(sp606不包括在内)。(c,d)遗忘Treg_4元簇中都所有HD(蓝灰色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(红色)的FlowSOM GITR隐含串联，结果显示直方平面图(c)和核心内容平面图(d)。Wilcoxon配对符号秩和验证，p< 0.07(红色)所有酪氨酸包括，p< 0.05(深蓝色)酪氨酸SP 606和匹配的HD不包括在测试中都。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中都GITR隐含，从分级除此以外，从所有HD(蓝灰色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(红色)串联，结果显示直方平面图(e)和核心内容平面图(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩验证

平面图4 来自较快困难重重的CD4+ treg蛋白掌控物理现象该CD4+T蛋白的能力减小。SP一组用深蓝色的支线和圆点暗示，HD一组用黑色的支线和圆点暗示，红色的支线/圆点暗示酪氨酸sp606。可用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T蛋白透过分选。CD4+CD25−(此番者)被标示出为CFSE, Treg按仔细观察的数量氢氧化钠。用抗CD3 /28微珠重置蛋白，培植3天内透过流式蛋白术检测。(a-d)与CD4+此番者相比较应该的treg培植(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD此番者培植。(a,b,f) CFSE裂解(a,e)和CFSE选择性多于(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的选择性多于。可用非典型印证(应答的响应该蛋白不含treg)计算选择性多于。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差归纳。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

平面图5 物理现象该CD4+T蛋白对较快困难重重的T蛋白重置的选择性更引人注目。SP一组用深蓝色的支线和圆点暗示，HD一组用黑色的支线和圆点暗示，红色的支线/圆点暗示酪氨酸sp606。可用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T蛋白透过分选。CD4+CD25−(此番者)被cfsel标示出，treg按仔细观察的数量氢氧化钠。用抗CD3 /28微珠重置蛋白，培植3天内透过流式蛋白术(CD25反染)和蛋白因子归纳。HD Treg与HD、SP或sp606此番者共同培植。(a,b) CFSE裂解(a)和CFSE选择性百分百余人(b)。(c,d) CD25选择性百分百余人(c)和CD134选择性百分百余人(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培植中都的隐含。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差归纳。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论证：我们得出的论证是，来自较快困难重重子的重置遗忘CD4+Treg在GITR隐含中都给予了引入和多样化，强调了全面性研究课题Treg在1同型高血压风险幼体中都的关联性的必要性。

原意出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28